Te Whakaritenga Me Nga Whakaritenga o te Adrenomedullin Heihei (ADM) Reagent

1. Serum: coagulation i te pāmahana rūma mo te 10-20 min, centrifugation mo te 20 min i te tere o 2000-3000 r.pm. Kia ata kohikohia te supernatant me te centrifuge ano mena ka puta te ua i te wa e rokiroki ana.

2. Plasma: Ko te EDTA me te konutai citrate me whiriwhiri hei anticoagulant kia rite ki nga whakaritenga o te tauira. I muri i te ranu mo te 10-20 meneti, centrifuge mo te 20 meneti i te tere o te 2000-3000 r.pm. Kia ata kohikohia te supernatant me te centrifuge ano mena ka puta te ua i te wa e rokiroki ana.

3. Mimi: kohikohi ki te ngongo horomata, centrifuge mo te 20 meneti i te tere o te 2000-3000 r.pm. Kia ata kohikohia te supernatant me te centrifuge ano mena ka puta te ua i te wa e rokiroki ana. Te wai o te kopu me te kopu, te whakatinanatanga tohutoro wai cerebrospinal.

4. Kohikohi tikanga pūtau: kohia ki te ngongo horomata ina kitea nga waahanga whakangao. Centrifuge mo te 20 meneti i te tere o te 2000-3000 r.pm. Kohikohia te supernatant. I te wa e kitea ana nga waahanga i roto i nga ruma, ka diluted te whakatārewatanga pūtau ki te PBS (pH 7.2-7.4), ka tae te kukū o te pūtau ki te 1 miriona/mL. Na roto i te whakatotoi me te whakamaroketanga, ka ngaro nga pūtau, ka tukuna nga waahanga intracellular. Centrifuge mo te 20 meneti i te tere o te 2000-3000 r.pm. Kohikohia te supernatant. Mena ka puta mai te ua i te wa e tiakina ana, whakahiatohia ano.

5. Tauira Tissue: I muri i te tapahi i te tauira, paunatia. Tāpirihia he nui PBS, PH7.4. Te whakamaarama tere i roto i te hauota wai hei whakamahi i muri mai. Ka noho tonu te tauira ki te mahana o te 2-8 nga nekehanga i muri i te rewa. Ko te nui o te PBS (PH7.4) i tapirihia, a ko te tauira i tino rite ki te ringaringa, ki te homogenizer ranei. Centrifuge mo te 20 meneti i te tere o te 2000-3000 r.pm. Kohikohia te supernatant. Wehea tetahi hei whakamatautau ka whakatio te toenga hei rahui.

6. Me tango wawe nga tauira i muri i te kohinga. Me whakahaere te tangohanga i runga i nga tuhinga e tika ana, me mahi nga whakamatautau i muri tonu i te tangohanga. Ki te kore e taea te whakamatautau tonu, ka taea te penapena i te tauira ki te -20 nga nekehanga, engari me karohia te tio me te whakamaroke.

7. Kaore e taea te kite i te tauira kei roto NaN3, na te mea ka aukati a NaN3 i te mahi HRP.